实验原理与流程

· iTRAQ（isobaric tags for relative and absolute quantitation）、TMT（tandem mass tags）两种标记定量技术均为体外标记定量技术，使用同位素标记试剂标记各个样本中多肽的氨基（K和多肽N末端）。首先将蛋白质酶解为多肽，然后各个样本使用不同标记试剂进行标记，标记后的样本混合后经过色谱分离, 质谱采集一级质谱和二级质谱。不同标记试剂在二级质谱中产生特异的定量报告离子，根据报告离子的相对强度即可计算出同一蛋白质的同一肽段在不同样品间的比值, 从而实现蛋白的相对定量。目前该方法可最多同时对16个样本进行相对定量分析。

技术优势

· 体外标记定量，适用于各类蛋白样本；

· 可同时对最多16个样本进行相对定量分析；

· 不同标记的样本混匀后同时上机检测，可有效排除上机检测带来的定量误差；

应用方向

· 各种不同条件处理后的蛋白样本。

送样要求

· 蛋白粉末：送样量>500ug；

· 动物组织：送样量>100mg；

· 牙齿：送样量>30g；

· 房水：送样量>500ul

· 植物组织：送样量>500mg；

· 血浆/血清样本：送样量>50ul

· 微生物菌体：送样量湿重>100mg

· 细胞：送样量>1x107个细胞或体积>50ul细胞沉淀

注意事项

· 样本须低温寄送，冰袋或者干冰寄送；

· 组织样本取样时需尽量切割目的组织；

· 含有致病性的病原菌样本须提前告知。